ショットガン・シークエンシング法の概要
ショットガン・シークエンシング法は、長いDNA塩基配列を決定するための手法の一つであり、主に
ゲノム解析において利用されます。この方法は、DNAを短いランダムな断片に分割し、それらの断片の配列を決定するプロセスに依存しています。まず、元のDNA配列を複数のコピーに分け、各コピーを短い断片にクローニングします。これにより、元の配列を構成する断片が得られます。
次に、得られた断片を用いてそれぞれの配列を決定します。重要な点は、これらの断片が互いにオーバーラップするように設計されることです。このオーバーラップ部分をコンピュータでアライメント(整列)させることによって、元のDNA配列を再構築することができます。たとえば、以下のようなプロセスを考えることができます。
簡略化した例
元のDNA配列が次のようであるとします:
```
XXXAGCATGCTGCAGTCATGCTTAGGCTAXXXX
```
ここで、第一回のショットガン配列は以下のようになります:
```
XXXXAGCATGCTGCAG
TCATGCTTAGGCTAXXXX
```
第二回のショットガン配列は次の通りです:
```
TTAGGCTAXXXX
XXXAGCATGCTGCAGTCATGC
```
このように得られたデータから、次のように再構築された配列が得られます:
```
XXXAGCATGCTGCAGTCATGCTTAGGCTAXXXX
```
実際の応用
実際にショットガン・シークエンシング法を適用する場合、通常は数千から数百万件の配列を扱う必要があります。ここでの課題は、データ中にさまざまなエラーが混在する可能性があることです。たとえば、
転写エラーやシークエンシングエラーが存在するため、正確なアライメントを行うには高度な技術と大規模な計算機資源が求められます。
ショットガン・シークエンシング法は、
2000年にはセレラ・ジェノミクス社がヒト
ゲノム計画に適用し、ヒトのDNAを正確にアライメントする作業に数多くのスーパーコンピュータをフル稼働させました。このプロジェクトでは、数ヶ月にわたって計算が続けられ、ヒトならではの複雑なDNA構造を解明するための重要な一歩となりました。
まとめ
ショットガン・シークエンシング法は、長いDNA配列を解析する上で非常に重要な手法であり、その効率性と有用性から多くの分野で利用されています。
ゲノム解析は今後も進化を続ける分野であり、新しい技術の開発により、より迅速かつ正確な配列決定が可能になることが期待されています。