色素試験

色素試験(しきそしけん)



色素試験は、トキソプラズマという寄生虫感染によって生成される抗体を定量的に測定するための試験法です。この方法はダイテスト(dye test)とも呼ばれ、感度と特異性が高いため、標準的な検査法とみなされています。しかし、トキソプラズマの感染を伴う虫体を用いることから、感染事故のリスクが高く、実際に実施されることはあまりありません。

原理



トキソプラズマは、アルカリ性メチレンブルーという染色試薬によってその虫体が均一に染色されます。しかし、抗トキソプラズマ抗体が存在すると、免疫系の一部である補体系が古典経路を介してトキソプラズマ虫体に作用し、細胞質が流出します。この結果、トキソプラズマ虫体はほとんど染色されなくなります。これにより、抗体の存在を示すことができます。

方法



色素試験の実施には、以下の手順があります:

1. 血清試料の処理: 血清試料を加熱処理して、内在する補体を非活性化します。
2. 段階希釈: 試料をいくつかの段階に希釈します。
3. 混合: 新鮮なトキソプラズマの虫体(タキゾイト)とアクセサリーファクターを混合し、希釈した試料に加えます。この際、アクセサリーファクターとしてトキソプラズマ未感染者の血清が必要です。
4. 感作: この混合物を37℃で1時間感作させます。
5. 染色: 最後に、アルカリ性メチレンブルーを加え、虫体を染色します。
6. 計測: 検鏡を行い、染色された虫体の割合を希釈段階ごとに計測します。染色されない虫体が過半数を超える最大の希釈倍率が、その試料の力価(抗体価)として評価されます。

アクセサリーファクター



色素試験で用いられるアクセサリーファクターは、トキソプラズマに未感染の健康な人の血清です。ただし、誰の血清でも利用できるわけではなく、適切な選別が求められます。

欠点



この試験法にはいくつかの欠点があります。
  • - 操作の煩雑さ: 手順が多く、技術的な習熟が必要です。
  • - 感染リスク: 使用されるトキソプラズマ虫体のため、感染事故のリスクが高いです。
  • - 抗体のアイソタイプ識別不可: 抗体の種別を特定することができません。
  • - 制限された対象: 一部の鳥類に対しては試験を行うことができません。

歴史



色素試験は、1948年にシンシナティ大学医学部(当時)で、アルバート・サビン博士とハリー・A・フェルドマン博士によって開発されました。彼らの研究により、トキソプラズマ感染症の診断において重要な役割を果たすこととなりました。この試験法は、その後も感染症の研究と診断技術として影響を与え続けています。

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