コスミド (Cosmid)
概要
コスミドは、分子
生物学研究で使用されるベクター(
遺伝子運搬体)の一種です。バクテリオファージと
プラスミドの特性を併せ持ち、特に約30kbpから45kbpという比較的大きなDNA断片をクローニングするために開発されました。
特徴
コスミドベクターは、バクテリオファージのDNAパッケージングシステムによって認識される
Cos領域(cohesive end site)と呼ばれる特殊配列を有しています。このCos領域により、コスミドDNAは効率的にファージ粒子内に詰め込まれます。
また、コスミドは
プラスミドとしての骨格を持ち、宿主細胞内での複製起点や選抜マーカーを備えています。一般的な
プラスミドに比べ、受け入れ可能な外来DNA断片のサイズが大きい点が最大の特徴です。
歴史的改良
初期のコスミドはCos領域が一つでしたが、後に二つのCos領域を持つように改良されました。これにより、挿入断片が正しく組み込まれた分子のみが効率的にパッケージングされるようになり、クローニング実験の効率が大幅に向上し、コスミドは実用的なベクターとして広く利用されるようになりました。
利用プロセス
コスミドを用いたクローニングでは、まず目的DNA断片とコスミドベクターを連結(
ライゲーション)し、組み換えDNAを作製します。次に、組み換えコスミドDNAをバクテリオファージの
パッケージングシステムで処理し、DNAをファージ粒子内に詰め込みます。最後に、パッケージングされたファージ粒子を
大腸菌に
感染させ、コスミドDNAを導入します。これにより、目的DNA断片が組み込まれた
大腸菌クローン(
形質転換体)が得られます。
主な用途
コスミドの大きなクローニング容量は、大規模なDNA断片を扱う研究に適しています。ゲノムDNAの断片化とライゲーションによる
ゲノムライブラリー構築や、
二次代謝産物生合成遺伝子群のような大きな
遺伝子クラスターの解析に利用されます。
関連用語
*
コスミドライブラリー: ある生物のゲノムDNAをコスミドベクターに組み込んで作製された
大腸菌クローン集団。