トロンボテスト

トロンボテスト (Thrombotest)

トロンボテストとは、血液が固まる過程、特に外因系と呼ばれる経路の凝固能力を調べる検査法で、プロトロンビン時間（PT）測定法の一種に分類されます。1959年にノルウェーのオーレン（Owren）によって考案されたこの検査は、ワルファリンをはじめとするビタミンK拮抗薬を用いた抗凝固療法を受けている患者さんの治療効果をモニタリングし、適切な薬用量を調整するために特に有用とされてきました。

血液凝固の仕組みとワルファリン

組織が傷つくと、組織因子が放出されます。この組織因子が血液中の第VII因子と結合することで、凝固反応の連鎖（カスケード）が始まります。この連鎖の中で、第IX因子や第X因子が活性化され、最終的にプロトロンビン（第II因子）が活性型のトロンビンへと変化します。トロンビンは血液中のフィブリノゲンを不溶性のフィブリンに変換し、これが血栓形成の足場となります。

プロトロンビン（第II因子）、第VII因子、第IX因子、第X因子といった凝固因子は、その機能を発揮するためにビタミンKが必要です。ワルファリンなどのビタミンK拮抗薬は、このビタミンKの働きを妨げることで、これらの凝固因子の活性を低下させ、血液が固まりにくくする作用を発揮します。しかし、薬の効果が出過ぎると出血リスクが高まるため、定期的な血液検査による効果判定が不可欠です。その代表的な検査として、世界中で広く行われているのがプロトロンビン時間（PT）検査です。

プロトロンビン時間（PT）とトロンボテスト

PT検査は、組織因子を添加したときに血漿が凝固するまでの時間を測定することで、外因系および共通系の凝固機能全体を評価します。PTには主に「クイック法」と「オーレン法」の二つの測定法があり、一般的にPTといえばクイック法を指すことが多いです。オーレン法は、測定原理から「プロトロンビンおよびプロコンバーチン（prothrombin and proconvertin）」法、略して「p and p」法とも呼ばれますが、日本では特に「トロンボテスト（TT）」として普及しました。

トロンボテストがPT検査と比較して優れる点として、被験者の血液に含まれるプロトロンビン、第VII因子、第X因子の活性をより正確に反映できる点が挙げられます。また、検査試薬の感度を示す国際感度指数（ISI）のばらつきが少ないとする報告もあります。

検査の方法

PT測定には、まず血液をクエン酸ナトリウム入りの採血管に採取し、遠心分離して得られた血漿を用います。この血漿にカルシウムを加えてクエン酸の抗凝固作用を中和し、凝固可能な状態に戻した後、組織因子（組織トロンボプラスチン）を含む試薬を添加します。試薬添加からフィブリンが析出して血漿が固まるまでの時間を光学的に測定することで、PTが算出されます。

トロンボテストでは、通常のPT試薬に加えて、硫酸バリウム処理によってプロトロンビン、第VII因子、第IX因子、第X因子を除去したウシ血漿を試薬として使用します。この処理により、被験者の血漿に試薬として加えられるウシ血漿からは、測定対象であるこれらの因子が供給されません。その結果、被験者自身のプロトロンビン、第VII因子、第X因子の活性がより特異的に測定できるという利点が得られます（ただし、測定時間が短いため第IX因子の影響はあまり反映されません）。オーレンが開発時に、入手しやすいウシ由来の組織トロンボプラスチンを用い、さらに凍結乾燥試薬として提供可能にしたことから、トロンボテストは特に北欧諸国を中心に広く利用されるようになりました。

検査結果の表示：PT比とINR

PT測定結果は、秒数で報告されるほか、正常値に対する比率として示すことがあります。これをPT比（プロトロンビン時間比）と呼び、被験者のPT（秒）を基準となる健常血漿のPT（秒）で割って算出します。しかし、使用する試薬によってPT値やそのばらつきが異なるため、国際的な基準として1983年に世界保健機関（WHO）によって国際標準化比率（INR: International Normalized Ratio）が定められました。INRは、PT比を試薬ごとに定められた感度指数（ISI）で補正した値であり、試薬の種類による影響を少なくして、施設や国境を越えて結果を比較可能にする目的で導入されました。

INRは、PT比をISI値でべき乗して算出されます。ISI値が高い試薬では計算上の誤差が大きくなる可能性があるため、WHOは0.9から1.7の範囲のISI値を持つ試薬の使用を推奨しています。トロンボテストの結果も、このINRで表示することが可能です。トロンボテストのISI値は比較的安定しているという報告があります。なお、INRは主にワルファリン療法などのビタミンK拮抗薬による抗凝固療法のモニタリングに特化して用いられる単位であり、肝機能障害や先天性の凝固異常症などの評価に用いることについては、WHOガイドライン上では明確に推奨されていません。

基準値と日本での現状

トロンボテストの結果は、凝固活性を示すパーセンテージ（%）またはINRで報告されます。健常な方の場合、通常は70%以上の凝固活性を示します。ワルファリンによる治療目標としては、一般的に凝固活性で10～25%程度、あるいはINRで2.0～3.0（疾患によって目標値は異なる）といった範囲が設定されることが多いです。

日本では、トロンボテストはワルファリンが導入された時期とほぼ同じ頃から広く使われてきました。しかし近年、クイック法によるPT測定とそのINR表示が技術的な改良によりばらつきが少なくなり、臨床での信頼性が高まったこと、また国際的な標準化が進んだことから、日本国内の臨床検査機関においてトロンボテストの実施を取りやめる動きが増えています。

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