光シート顕微鏡法について
光シート
顕微鏡法(ひかりシートけんびきょうほう)は、試料の側面から薄い光のシートを用いてその焦点を合わせた画像を取得する
顕微鏡技術です。この方法は特に生きた細胞や胚の観察において有効で、従来の手法が直面する制約を克服するために開発されました。
従来技術の限界
従来の共焦点
顕微鏡や2光子
顕微鏡は、試料の正面に強い照明を当てるため、特に反射率の低い生きた細胞に悪影響を及ぼすことがありました。これに対して、光シート
顕微鏡法は光を側面から照射することで、細胞への負担を軽減しつつ、より深い部分までの観察を可能にします。
光毒性の低減と時間解像度
光シート
顕微鏡法を使用することで、光毒性を気にすることなく、実験の時間分解能を高められます。これは、試料を観察する際に適した性能を発揮し、生きた状態の細胞に対しても持続的に観察を行うことができます。しかし、空間分解能に関しては、
開口数(NA)が高い
対物レンズが使用できないため、共焦点
顕微鏡と比べると性能が劣る場合があります。
深部観察の利点と課題
光シート
顕微鏡法では、深部の観察が可能である一方で、焦点を正確に合わせないと、同一平面内であっても照射光がサンプルに届かない部分で背景光が増加し、画質が損なわれる可能性があります。これにより、縞状の影が発生することがあり、その点が観察時の課題として残ります。
参考文献
光シート
顕微鏡法についての詳細な文献も充実しており、以下のような研究が行われています。たとえば、野中茂紀による「光シート
顕微鏡の展望」では、技術の発展や未来の可能性について議論されています。また、Chenらの研究「Lattice light-sheet microscopy」では、高い空間的および時間的解像度での細胞観察について述べられています。
結論
光シート
顕微鏡法は、生体細胞を傷めることなく良好な画質で観察可能という利点を持ち、生物学や医学の研究において重要な役割を果たしています。技術が進化することで、今後さらに多くの応用が期待されており、生体試料に対する深部イメージングの技術は今後も注目されるでしょう。