カルス:植物バイオテクノロジーの基盤
植物科学の分野において「カルス」という言葉は、特別な意味を持つ細胞の集合体を指します。これは、試験管内の固形
培地などで人工的に培養されている、まだ特定の組織や器官に
分化が進んでいない状態にある
植物細胞の塊のことです。この未
分化な細胞塊は、癒傷組織や癒合組織と呼ばれることもあります。
元々、カルスは
植物体が傷を受けた際に、その傷口に自然に形成される未
分化な組織を指す言葉でした。現在では、主に人為的な培養条件下で得られる細胞塊を指すことが一般的ですが、その本質はどちらも「
分化していない
植物細胞の集まり」という点で共通しています。
植物細胞の驚くべき能力:分化全能性
一度、
根や葉、茎といった特定の機能を持つ細胞へと
分化した後でも、
植物細胞は再びあらゆる種類の細胞や組織、さらには完全な個体へと発生し得る潜在的な能力を持っています。この能力を「
分化全能性」と呼びます。普段、成熟した
分化細胞の多くは、
細胞分裂を停止した「G0期」という特別な状態にありますが、適切な条件を与えられると、再び活発に分裂・増殖を始め、未
分化な状態に戻ることができます。この過程を「脱
分化」といい、カルスはまさにこの脱
分化によって作り出された未
分化細胞の集まりなのです。
脱
分化させた細胞は、その周囲の環境、特に
培地に含まれる
植物ホルモンの種類や濃度バランスを調整することで、再び様々な方向へと
分化を誘導することが可能になります。
カルスの作製方法
カルスを得るためには、通常、目的とする
植物体の一部(葉、茎、
根、花の一部など)を切り出し、栄養分と共に特定の
植物ホルモン、特に
オーキシンと
サイトカイニンが適切な濃度で含まれた
培地に置いて培養します。これにより、切り出した組織の細胞が脱
分化を始め、盛んに分裂・増殖してカルスが形成されます。
このプロセスにおいて極めて重要なのは、徹底した無菌操作です。使用する
植物材料から
培地、器具に至るまで完全に滅菌し、微生物による汚染を防ぐ必要があります。また、カルスの形成を誘導するために最適な
植物ホルモンの種類や濃度、あるいは必要とされる糖や窒素源といった栄養条件は、
植物の種類や利用する組織の種類によって大きく異なります。そのため、
植物種ごとに最適な培養条件を検討することが必要となります。
カルスの多彩な利用法
カルスが持つ
分化全能性や培養の容易さは、
植物に関する研究や産業において様々な形で活用されています。
1.
組織培養による植物個体の再生
カルスを、
オーキシンと
サイトカイニンの濃度バランスを変えた新しい
培地に移すと、再び細胞の
分化が始まります。例えば、
サイトカイニンに対する
オーキシンの濃度が高い
培地では
根の形成が促進され、逆に
サイトカイニンの濃度が高い
培地では不定
芽の形成が誘導されます。このように
培地のホルモンバランスを適切に制御することで、カルスから最終的には
根、茎、葉を備えた完全な
植物体へと再生させることが可能です。
この方法で再生された
植物は、元の
植物体の一部から得られたカルス由来であるため、原則として元の
植物と遺伝的に全く同じ、いわゆる
クローンとなります。
しかし、カルスを経由した再生個体では、培養中に遺伝的な変異(培養変異)が比較的高い頻度で発生することが知られています。そのため、完全に均一な性質を持つ品種を大量に増殖したい場合には、カルス化を経由せず、茎葉などの器官の形態を保ったまま増殖させる方法が選ばれることが多いです。
オーキシンが
分化にどのように関わるかについては、まだ不明な点も多く残されています。
2.
細胞融合による新しい雑種の作出
植物細胞は強固な
細胞壁に囲まれていますが、
セルラーゼなどの酵素処理によって
細胞壁を取り除くと、「プロトプラスト」と呼ばれる丸裸の状態の細胞になります。異なる種類の
植物から得たプロトプラストを混ぜ合わせ、
ポリエチレングリコール(PEG)処理や電気パルスなどの刺激を与えることで、プロトプラスト同士を融合させることが可能です。これが細胞融合技術です。
異種間のプロトプラストが融合してできた細胞を「
雑種細胞」と呼びます。この
雑種細胞は再び
細胞壁を再生した後、分裂・増殖してカルスを形成します。この
雑種カルスから
組織培養の手法を用いて
植物体を再生することで、両親の特性を併せ持つ可能性のある新しい
雑種植物を作り出すことができます。この方法は、通常の
交配では
雑種ができないような遠縁の
植物間でも試みることが可能です。
細胞融合によって作出された例としては、
ジャガイモと
トマトの
雑種である「ポマト」や、
ハクサイと
キャベツの「ハクラン」などが知られています。ただし、遠縁の
植物間の融合では、
染色体の不安定化による欠失や、再生した
植物が稔性を持たない(種子を作れない)といった問題が多く発生し、実用的な品種が得られるケースは限られています。
3.
遺伝子組み換え作物の開発
カルスは、
遺伝子組み換え技術を用いて新しい特性を持つ作物を開発する際にも非常に重要な材料となります。
広く用いられる手法の一つに、
アグロバクテリウムという土壌細菌を利用する方法があります。
アグロバクテリウムはある種の
植物細胞に感染し、自身の持つ
プラスミド(環状DNA)の一部を
植物細胞の
染色体内に組み込む性質を持っています。この性質を利用して、導入したい目的の
遺伝子を
アグロバクテリウムの
プラスミドに組み込み、これを
植物細胞に感染させます。
遺伝子を次世代に伝えるためには、
生殖細胞を含む
植物体全体に導入
遺伝子が行き渡るか、あるいは感染した細胞から
植物体を再生する必要があります。そこで、感染処理を行った
植物組織からカルスを誘導したり、直接カルス細胞に
アグロバクテリウムを感染させたりする方法が取られます。
遺伝子が
染色体に安定して組み込まれたカルス細胞を選び出し、これを再び
組織培養によって完全な
植物体へと再生させます。
こうして得られた
植物体は、目的の
遺伝子を安定的に持ち、それを子孫にも伝えることができる
遺伝子組み換え作物となります。
結び
カルスは、
植物細胞の持つ驚異的な
分化全能性を引き出し、活用するための鍵となる存在です。基礎的な
植物研究から、病気に強い品種や栄養価の高い品種の開発、さらには新しい
植物種の創出に至るまで、現代の
植物科学、特に
植物バイオテクノロジーの様々な分野において、カルスは欠かせない材料としてその役割を果たしています。