サイバーグリーン(SYBR Green)は、
分子生物学の研究分野において、
核酸、特に二本鎖DNA(dsDNA)を可視化したり定量したりするために広く利用されている蛍
光色素です。略称としてはSGが用いられることもあります。化学的には非対称シアニン
色素に分類され、その
化学式はC₃₂H₃₇N₄S⁺、
CAS登録番号は[163795-75-3]です。
この
色素の最も重要な特性は、DNAの
二重らせん構造に対して高い選択性を持って結合することです。溶液中に遊離した状態では蛍
光強度が非常に低いのですが、DNAの塩基対の間に挿入する(インターカレートする)形で結合すると、その蛍
光量子収率が劇的に向上します。励起
光として青色
光(約488
ナノメートル)を照射すると、結合したサイバーグリーンは約522
ナノメートル付近の緑色
光として強い蛍
光を発するようになります。
この蛍
光特性を利用して、サイバーグリーンは様々なアプリケーションで
核酸染色剤として使用されています。例えば、電気泳動によって分離したDNAバンドをアガロースゲル上で検出する際に用いられます。紫外線を照射することで、サイバーグリーンが結合したDNAバンドが緑色の蛍
光を発するため、容易にその位置やバンドの量を確認することができます。
サイバーグリーンが普及した大きな理由の一つに、従来から用いられていた
核酸染色剤である
臭化エチジウム(Ethidium bromide)の代替としての側面があります。
臭化エチジウムは非常に強い変異原性および
発癌性が指摘されており、取り扱いには厳重な注意が必要でした。サイバーグリーンは、
臭化エチジウムと比較して変異原性が低いとされており、より安全性の高い代替品として多くの研究室で採用されています。ただし、サイバーグリーンもDNAに結合する性質を持つため、完全に無毒というわけではありません。取り扱いには適切な安全対策を講じることが重要です。実際に、細菌を用いたエームズ試験などにおいて、これらの
色素の変異原性が比較検討されています。
また、サイバーグリーンはリアルタイムPCR(
定量PCR)において、DNA増幅を検出するための主要な方法の一つである「SYBRグリーン法」にも利用されています。リアルタイムPCRでは、DNAが増幅されるにつれて反応液中の二本鎖DNAの量が増加します。サイバーグリーンはこの増加した二本鎖DNAに結合し、蛍
光強度が増加するため、PCRサイクルごとのDNA量の変化をリアルタイムでモニターし、定量的な解析を行うことが可能となります。
サイバーグリーンにはいくつかの誘導体が存在し、それぞれにわずかな特性の違いがあります。代表的なものとしては、SYBR Green I、SYBR Green II、SYBR Goldなどが挙げられます。これら以外にも、YO(Oxazole Yellow)、TO(Thiazole Orange)、PG(PicoGreen)など、同様の原理で
核酸を染色するシアニン系
色素が開発されています。
サイバーグリーンは、その高いDNA選択性と蛍
光特性、そして
臭化エチジウムよりも低い毒性プロファイルから、現代の
分子生物学研究において不可欠なツールの一つとなっています。