標準
寒天培地(Standard Methods Agar; SMAまたはPlate Count Agar; PCA)は、微生物学において生細菌の増殖状況を評価したり、モニタリングするための基本的な
培地です。特に、この
培地は選択的ではなく、さまざまな微生物の生育を促進する特性を持っています。
生菌数の測定
生きている好気性細菌の総数を測定する際は、標準
寒天培地が用いられます。この
培地には、細菌が成長するために必要な栄養素が豊富に含まれており、特に
カゼイン、
酵母エキス、
グルコースが重要な役割を果たします。
カゼインは
窒素、炭素、アミノ酸、
ビタミン、
ミネラルを供給し、
酵母エキスは
ビタミンB群を提供します。さらに、
グルコースは発酵可能な炭水化物として機能し、
寒天は
培地を固形にするための凝固剤です。
この
培地を使用することで、固体検体では1gあたりのコロニー形成単位(CFU/g)として、液体検体では(CFU/ml)として計測することが可能です。
Pour Plate Technique
標準
寒天培地の調製には、Pour Plate Techniqueが一般的です。この方法では、事前に溶かした
寒天液に接種菌を加え、約45℃まで冷却した後に無菌状態でシャーレに流し込みます。その後、プレートを回転させて接種した検体が均一に混ざるようにします。この工程は、培養を行う前の重要なステップであり、温度が20〜30℃の環境下で約3日間培養されます。
利点
標準
寒天培地には多くの利点があります:
1.
調製が容易: 専門的なスキルや設備がなくても、簡単に調製できます。
2.
低濃度での検出: Surface Spread Methodよりも多くの検体量を取り扱えるため、低濃度の微生物も検出可能です。
3.
事前準備が不要: プレートを前もって準備する必要がなく、迅速に使用できます。
4.
コロニーの分離: 得られたコロニーは、異なる細菌の種類を識別するのに十分な距離を保って成長します。
5.
食品の検査: 食品サンプルにおける細菌の汚染度を判定できるこおともあります。
この
培地を利用した測定は、主にCFU(コロニー形成単位)として記録されます。各コロニーは、単一の細菌に由来するものもあれば、細菌群からのものもあるため、CFUは微生物の密度を正確に反映する指標となります。
ストリークプレート法
プレート上の個々のコロニーを形成させる方法として、ストリークプレート法が用いられます。これは、未知の微生物を識別する際に特に有効で、以下の手順で行われます:
1.
プレートのラベリング: まず、プレートの底に必要な情報をラベルします。
2.
象限の分割: プレートを4つの象限に分けて可視化し、適切に塗布を行います。
3.
塗布作業: 最初の象限に混合培養液を縞状に塗布し、次に他の象限に進みます。各象限でのループの冷却を忘れず、適切に塗布していきます。
これらの技術を駆使することで、微生物の同定や評価が可能になり、研究や品質管理の現場で不可欠な手法となっています。