ベクターは、
遺伝子工学において、外部から特定の遺伝子やDNA、RNAの断片を標的となる細胞内へ運び込むために用いられるDNAまたはRNA分子です。
ラテン語で「運び屋」を意味する言葉に由来し、遺伝情報の輸送媒体として機能します。これにより、導入された遺伝子の細胞内での増殖、維持、あるいは
タンパク質としての発現を可能にします。遺伝子組換え技術において不可欠なツールであり、
プラスミド、
ウイルス、
人工染色体などが、目的や用途に応じて使い分けられています。これらのベクターには、実験操作を効率化するために、
複製開始点、複数の
制限酵素で切断できる
多目的クローニングサイト(MCS)、そしてベクターを取り込んだ細胞を選び出すための
マーカー遺伝子といった機能を持つものが多いのが特徴です。
遺伝情報の細胞への導入には主に二つの目的があります。一つは、導入した遺伝子断片を細胞内で大量にコピー(
クローニング)すること。もう一つは、導入遺伝子から特定の
タンパク質を合成(
発現)させることです。これらの目的に特化したベクターが存在し、遺伝子断片の増幅や保存を主目的とする
クローニングベクター、導入遺伝子から
タンパク質を作らせることを目的とする
発現ベクターなどがあります。また、
タンパク質合成は行わず、転写によるmRNAの増幅のみを目的とする
転写ベクターもあります。このように、導入したいDNA断片のサイズや、細胞内でどのような操作を行いたいかによって、適切なベクターが選択されます。
ベクターを細胞内に取り込ませる方法も、
宿主細胞の種類によって異なります。
細菌細胞では
形質転換、真核細胞では
トランスフェクションと呼ばれるのが一般的です。
ウイルスベクターを用いる場合は、
形質導入と呼ばれることもあります。特定の
細菌だけでなく、
酵母や植物、哺乳動物など、多様な生物の細胞で機能するように設計されたベクターは
シャトルベクターと呼ばれます。
代表的なベクタータイプとして、
プラスミドベクターがあります。
プラスミドは、多くの
細菌に見られる環状二本鎖DNA分子で、
宿主細胞の複製機構を利用して増殖します。ベクターとして改変された
プラスミドは、自律的な複製のために
複製起点を含んでいます。クローニング用途の
プラスミドには、外来遺伝子を挿入するためのマルチクローニングサイトや、細胞選択のための
抗生物質耐性遺伝子が付加されています。発現ベクターとしての
プラスミドには、
タンパク質翻訳に必要な配列(
リボソーム結合部位、開始・終止コドンなど)が含まれています。pUC
プラスミドやpET系
プラスミドなどが代表的な
プラスミドベクターです。
ウイルスベクターは、非感染性に改変された
ウイルスやバクテリオ
ファージの複製・感染機構を利用するものです。導入遺伝子を細胞に効率よく運び込み、
ウイルス由来の
プロモーターによって転写や翻訳を行います。安全のため、多くの
ウイルスベクターは自己複製能力を持たず、特別な細胞(パッケージング細胞)を介して扱われます。これにより、
遺伝子治療など安全性が求められる分野で応用されています(レトロ
ウイルス、
アデノウイルスなど)。一部の
ウイルスベクターは、導入遺伝子を
宿主のゲノムDNAに安定して組み込むことができます。
さらに大きなDNA断片を扱う場合には、
人工染色体ベクターが用いられます。これには
酵母人工染色体(YAC)、
細菌人工染色体(BAC)、
ヒト人工染色体(HAC)などがあり、通常のベクターよりはるかに長いDNAを搭載できます(BACでは最大30万塩基対以上)。
複製起点、セントロメア、テロメアといった、
染色体機能に必要な要素を含んでいます。
導入遺伝子の機能発現は、
転写と
翻訳を経て行われます。まず、DNA上の導入遺伝子情報がmRNAとしてコピーされる転写が行われ、その効率やタイミングはベクターに組み込まれた
プロモーターによって制御されます。常に発現する
恒常的発現や、特定の刺激に応答する
誘導可能発現などがあり、
プロモーターの種類で選択できます。転写されたmRNAに基づき
タンパク質が合成されるのが翻訳です。発現ベクターは、この翻訳を効率よく行うために、
プロモーターに加え、
リボソーム結合部位や開始・終止コドンなど、翻訳に必要な要素を備えています。これらの要素は
宿主細胞によって異なります。
ベクターには、実験を円滑に進めるための様々な
付加機能が組み込まれています。ベクターを取り込んだ細胞を選択する
抗生物質耐性遺伝子、導入遺伝子が正しく挿入されたかを確認する
レポーター遺伝子(lacZ遺伝子を利用したブルー・ホワイトセレクションなど)、発現させた
タンパク質を特定の場所に誘導する
ターゲティング配列、そして精製を容易にするための
タグ配列などが代表的です。
このように、ベクターは
遺伝子工学における多様な操作を可能にする不可欠なツールであり、生命科学研究から応用分野まで幅広く利用されています。