LAMP法とは
LAMP法(Loop-Mediated Isothermal Amplificationの略)は、特定の遺伝子配列を迅速に増幅する手法です。この技術は、主に体外診断用医薬品や感染症の検査において利用されています。
方法の概要
この方法では、まず標的遺伝子の配列から6つの異なる領域を選定し、それを基に4種類の
プライマーが設計されます。これらの
プライマーは、鎖置換反応を使用して遺伝子を増幅し、このプロセスでは、最初の増幅産物にループ構造が形成されるのが特徴です。ループ部分は一本鎖のため、次に作用する
プライマーが結合することができます。この一連のプロセスでは、特殊なDNA合成酵素が用いられ、進行方向にある二本鎖DNAを解離しつつ、伸長反応が進められます。
最終的な結果として、元の標的配列の約整数倍の長さの増幅物が生成され、通常、65℃で行われる約1時間の反応によって蓄積されます。このため、生成された反応産物を電気泳動すると、明確なラダー状のパターンが観察されます。
LAMP法の利点
LAMP法はPCR(
ポリメラーゼ連鎖反応)と比較して、いくつかの利点があります。特に、1本鎖から2本鎖への変性反応が必要ないため、60℃から65℃の一定温度での反応が可能です。このため、PCRで必要とされるサーマルサイクラーのような高価な機器が不要です。また、増幅速度が速く、特異性も高いため、標的以外のDNAが増幅される可能性が低くなります。このように、反応液が白濁することで、標的テンプレートが増加したかどうかを迅速に確認できる点が大きな利点とされています。
この技術は、
栄研化学が商標権を有しており、多くの検査キットに利用されています。
LAMP法の応用例
LAMP法は、特に感染症の検査において多くの製品が開発されています。例えば、以下のような検査キットがあります:
- - 結核菌群検出試薬キット
- - 百日咳菌検出試薬キット
- - マイコプラズマP検出試薬キット
- - レジオネラ検出試薬キット
- - インフルエンザウイルス検出試薬キット(H1 pdm 2009、A型、H5亜型)
- - 新型コロナウイルス検出試薬キット
加えて、環境衛生検査にも使用されており、
クリプトスポリジウムや
ジアルジアを検出するための試薬キットも存在します。
まとめ
LAMP法は、その効率的な遺伝子増幅能力により、医学的および環境衛生の分野で重要な役割を果たしています。今後もこの技術の進化が期待されます。