Β-グルクロニダーゼ

β-グルクロニダーゼ (β-Glucuronidase, GUS)



β-グルクロニダーゼ(ベータ・グルクロニダーゼ、略称 GUS、EC 3.2.1.31)は、D-グルクロン酸が他の分子とβ結合した配糖体、すなわちグルクロニドの化学結合を加水分解する働きを持つ酵素群の総称です。この酵素は、グルクロン酸部分と、それに結合しているアグリコン(非糖部分)との間の結合を切断し、それぞれの分子を遊離させます。

基質となる物質



β-グルクロニダーゼは、多種多様なアグリコンを持つグルクロニドに作用することが知られています。研究室で行われる酵素活性の測定では、反応によって遊離したアグリコンを容易に検出できるよう、フェノールフタレインなど特定の分子が結合した人工的な基質がよく用いられます。しかし、酵素自体のアグリコンに対する特異性は比較的高く、アルコール類、ステロイド、カルボン酸など、幅広い種類の化合物のβ-D-グルクロニドを分解する能力を持っています。

ただし、生物の体内でこの酵素が本来分解している「真の」基質(天然基質)が具体的にどのような物質であるかは、酵素が存在する生物種や組織によって異なり、全てが完全に解明されているわけではありません。また、β-グルクロニダーゼの性質は、その由来となる生物種によってかなりの違いがあることも分かっています。

生物における分布と細胞内の存在場所



β-グルクロニダーゼは、生命界の様々な生物に見られます。

動物: 動物の体内では、ほとんど全ての組織に存在していると考えられています。血液の成分である血漿のような体液中にも常時検出されるほか、特に脾臓肝臓腎臓といった臓器では、この酵素の活性が非常に高いことが知られています。動物細胞内では、主にリソソーム(細胞内の分解を担当する小器官)やミクロソーム(代謝に関わる膜構造)に局在しています。
植物・微生物: 高等植物や微生物にもβ-グルクロニダーゼは存在します。しかし、多くの高等植物細胞においては、内因性のβ-グルクロニダーゼ活性が非常に低いのが特徴です。

β-グルクロニダーゼを研究目的などで大量に精製する場合、酵素活性が特に高い生物や組織が材料として選ばれます。例えば、ラット陰核カタツムリ、カサガイなどは、効率よく酵素を抽出できる供給源としてよく利用されています。

遺伝子研究への応用



多くの高等植物細胞ではβ-グルクロニダーゼの活性がほとんど見られないという特性は、植物の遺伝子操作技術において非常に重要な利点をもたらしています。具体的には、大腸菌由来のβ-グルクロニダーゼ遺伝子(uidA遺伝子)が、植物細胞に導入された他の遺伝子が目的通りに働いているか(発現しているか)を調べるためのレポーター遺伝子として、広く活用されています。

この技術では、調べたい遺伝子の働きを制御するDNA配列(例えばプロモーターなど)にuidA遺伝子をつなぎ合わせ、この複合遺伝子を植物細胞に導入します。もしその制御配列が細胞内で活性化されれば、それに続いてuidA遺伝子が発現し、β-グルクロニダーゼ酵素が作られます。細胞内でこの酵素が生成されているかどうかは、特定の無色の基質(例えばX-Gluc)を加えることで確認できます。β-グルクロニダーゼが存在すれば基質が分解されて発色(通常は青色)するため、遺伝子発現の場所や強さを目で見て判断できるのです。このGUSアッセイは、植物の発生や環境応答、病気抵抗性など、様々な研究分野における遺伝子発現解析に不可欠な手法となっています。

まとめ



β-グルクロニダーゼは、生体内におけるグルクロン酸抱合体の分解という重要な生理機能に加え、特に植物科学分野における遺伝子発現の可視化ツールとして、基礎研究から応用研究まで幅広く貢献している酵素です。

もう一度検索

【記事の利用について】

タイトルと記事文章は、記事のあるページにリンクを張っていただければ、無料で利用できます。
※画像は、利用できませんのでご注意ください。

【リンクついて】

リンクフリーです。