フォーゲスプロスカウエル試験

フォーゲスプロスカウエル試験（VP試験）

フォーゲスプロスカウエル試験（Voges–Proskauer test、略称VP試験）は、微生物の培養過程におけるアセトインの検出に使用される重要な技術です。本試験は、特に大腸菌の同定を目的としたIMViC試験の一部であり、この試験群には他にインドール試験、メチルレッド試験、クエン酸塩利用試験が含まれています。

適用範囲

VP試験は特定の細菌の同定に有効です。陽性反応を示す細菌にはエンテロバクター属、クレブシエラ属、セラチア・マルセッセンス、ハフニア・アルヴェイ、コレラ型ビブリオなどが含まれます。一方、陰性反応を示す細菌にはシトロバクター属、赤痢菌属、エルシニア属、エドワージエラ属、サルモネラ属などが存在します。これにより、微生物学の研究や診断の場面で、特定の細菌を識別するために広く利用されています。

試験原理

本試験の原理は、細菌が行う発酵過程に基づいています。多くの細菌は、グルコースを解糖系で分解し、ピルビン酸を生成します。その後、一部の腸内細菌はピルビン酸を起点にしてブチレン・グリコール発酵を行い、最終的に二酸化炭素と水素を生成します。この過程では、アセトインという中間生成物も生成されます。試験においては、アセトインが酸素と反応し、VP試薬に含まれる水酸化カリウムと結びつくことで、赤色のジアセチルが生成されるため、陽性反応が示されます。

試験手順

実際のVP試験は、注意深く行われる必要があります。まず、白金線を使って、培地から少量の微生物を取り出し、VP試験用の培地に接種します。この培地はVP半流動培地またはMR-VP培地を使用します。接種後は、VP半流動培地なら37℃で18～24時間、MR-VP培地は28～30℃で24～48時間培養します。

培養後、最初にA液（6%α-ナフトール溶液）を1ml加え、続いてB液（0.3%クレアチン溶液）を0.2ml追加し、よく振ることで反応を促進します。この順序を誤ると、陽性反応が減少することがあります。通常、15分ほどで色の変化が現れますが、場合によっては1時間待つこともあります。特にYersinia属については生育温度により反応が異なるため、2つの異なる温度で培養を行うことが推奨されます。

培地の組成

VP半流動培地の成分は以下の通りです。これにより、理想的な条件で細菌が成長できるようになっています。

• - 酵母エキス 1.0g
• - カゼインペプトン 7.0g
• - ソイペプトン 5.0g
• - ブドウ糖 10.0g
• - 塩化ナトリウム 5.0g
• - 寒天 3.0g
• - 精製水 1000ml

歴史

フォーゲスプロスカウエル試験は、1898年にドイツのロベルト・コッホ研究所に所属していた細菌学者であるダニエル・ヴィルヘルム・オットー・フォーゲスとベルンハルト・プロスカウエルによって開発されました。彼らの研究は、今日まで広く引用され、微生物学の基礎を築く一助となっています。

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